3 . 2 . 2 抗病毒作用蜂膠中的黃酮類化合物和 3- 甲基 - 丁烯 -2 咖啡酸酯對單純型皰疹病素( HSV-1 )、腺病毒 -5 、流感病毒、輪狀病毒、口腔炎病毒等均有滅活作用,尤其對 HSV-1 作用明顯。 3- 甲基 - 丁烯 -2 咖啡酸酯能使 HSV-1 病毒效價降低,病毒 DNA 的合成能力為原來的 1/32 。黃酮醇的活性較強,黃酮類漸弱,高良美素、山柰酚、槲皮素對病毒的滅活作用依次漸弱,黃酮醇和黃酮並用時的作用比單用時用用更強,提示各種成分協同用作是蜂膠抗病毒活性強於各單體的主要原因。

對蜂膠乙酸乙酯提取物 6 種肉桂酸類化合物進行體內外實驗表明,其中的阿魏酸異戊酯能顯著抑制流感病毒 H 3 N 3 的感染性和產生血凝素的能力。試驗還表明,在培養基中加入上述 6 種提取物時,病毒的複製受到最大的抑制。病毒轉型變異和 DNA 分析實驗表明,蜂膠提取物 CAPE 能選擇性地抑制腺病毒與對鼠胚胎成纖維細胞的轉克隆並呈量效關係,低濃度時雖能抑制病毒生長,但不能抑制病毒基因的表達。近期研究表明,蜂膠還可以通過免疫反應系統來抑制 HIV-1 病毒的表達,首先用一定濃度的蜂膠溶液處理 CEM 細胞,隨後用 HIV-1 病毒感染細胞,當蜂膠濃度為 4.5 μ mol/L 時,可以破壞合體細胞的形成,在低濃度時可抑制合體細胞的形成,進一步研究表明,蜂膠可以抑制 P24 抗原的產生,最大抑制率達 90% — 100% 。

3 . 3 蜂膠保護肝臟的作用

3 . 3 . 1 蜂膠提取物對四氯化碳肝臟操作的保護作用四氧化碳可致動物肝臟發生病變,動物攝入一定量的四氯化碳後,肝臟的生化指標改變和組織發生病變。近年來研究表明,蜂膠對四氯化碳致動物肝臟損傷有明顯的保護作用。 L.G.Mahran 等研究發現,預先將不同濃度的水溶性蜂膠與肝細胞溫育 30min ,再用四氧化碳處理 30min ,然後分析肝細胞乳酸脫氫酶的釋放、脂質過氧化物的形成及細胞間不原型谷光胱甘肽的減少等指標,結果表明,蜂膠呈劑量依賴性地保護肝細胞的損傷,其機制可能是蜂膠水提取液含有一種抗氧化劑和自由基清除劑,可以幫助肝細胞維持一定濃度的還原型谷胱甘肽。組織病理學的研究表明,古巴紅蜂膠不僅可以降低四氯化碳引起鼠肝臟三醯甘油濃度的升高和降低油清轉氨酶的活性,而且可以顯著減少肝臟脂肪變性區氣襄化細胞的數量。 Sharmam 等給大鼠每天喂飼四氯化碳 : 花生油為 1:1 的溶液 0.1ml/kg , 20d 後,大鼠血清轉氨酶、丙氨酸傳氨酶、天冬氨酶活性顯著升高,血液和組織的谷胱甘肽含量顯著下降,血液和肝組織指質過氧化物含量升高。當喂飼 100mg/kg 蜂膠後,各項生化指標顯著改善,肝脂質過氧化水準也顯著下降。結果表明,蜂膠對四氯化碳致鼠肝臟損傷有顯著的保護作用。

3 . 3 . 2 蜂膠對酒清致肝臟損傷的保護作用 S.C.Lin 等研究發現,蜂膠對酒精造成的肝損傷

也有保護作用。每天在對照組大鼠的飼料中加入 3.125ml99.5% 的酒精,連續 4 周造成肝損傷,血清轉氨酶和甘油三酯顯著升高,並有脂肪肝出現。如果在飼喂酒精前喂給大鼠不同劑量的蜂膠醇取液,結果發現,當給藥劑量為 10mg/kg 體重時,血清轉氨酶和甘油酯水準顯著降低( ρ < 0.001 。組織病理學進一步分析表明,當蜂膠供給量為 30mg/kg 體重時,蜂膠組大鼠肝脂肪變質程度明顯下降。蜂膠對慢性酒精中毒致鼠肝微粒體酶的活性也有顯著的影響,當供給 30mg/kg 體重的蜂膠可以防止總細胞色素 P-450 酶,依賴 NADPH 的細胞色素還原酶, 7- 乙氧基試鹵靈羥基化以及肝脂質過氧化的升高,而 100mg/kg 體重的蜂膠則可以誘導 r - 穀氨醯半胱氨醯合作酶和穀氨醯 -S- 轉移酶的產生,降低肝中谷胱甘肽的含量。

3 . 3 . 3 蜂膠對 D- 半乳糖胺誘導肝損傷的保護作用應用透射電子顯微鏡技術和生化分析技術研究發現,古巴紅蜂膠對 1000mg/kg 半乳糖胺誘導的鼠肝炎有保護作用。當蜂膠供給量為 10 — 100mg/kg 體重,可以明顯防止半乳糖胺誘導的肝細胞的改變,逆轉血清丙氨酸轉氨酶活性和丙二醛濃度的升高。 Sugimoto Y. 等的研究也證明,蜂膠提取物對 D- 半乳糖胺致鼠肝臟損傷有很好的保護作用,改變病變大鼠血清天冬氨酸轉氨酶和丙氨酸酶的活性。近年來研究發現,蜂膠水提取物中的有機酸類化合物也具有護肝作用, P.Basnet 從蜂膠中分離出 5 種奎尼酸的衍生物,其中有 4 種被證明對四氯化碳和 D 一半乳糖胺致大鼠肝臟損傷有保護作用,它們分別是:甲基 -3.4- 二 -O- 咖啡醯奎尼酸; 3.4- 二 -O 咖啡醯奎尼酸;甲基 -4.5- 二 -O- 咖啡醯奎尼酸和 3.5- 二 -O- 咖啡醯奎尼酸;甲基 -4.5- 二 -O 咖啡醯奎尼酸和 3.5- 二 -O 咖啡醯奎尼酸。

綜上所述,蜂膠對化學物質致動物肝臟損傷有保護作用,這種保護作用不是蜂膠中的某一種成分,而是多種活性成分協調作用的結果。

3 . 4 蜂膠的免疫調節作用

通過對大小白鼠、豚鼠、家兔、豬、牛犢的實驗證明,將蜂膠或配合抗原引入機體,能增強機體的免疫功能。

鼠體外試驗和不同給藥途徑的體內試驗表明,蜂膠水提取物對血中兩種補體水準(補體經典途徑和補全選擇途徑)均有顯抑制作用,作用程度因給藥途徑和補體來源不同而有一定的差別,水提取物還能抑制補體參與的溶血過程,且與溫度和時間相關,高濃度時對薄紅細胞有直接損害作用。蜂膠水提取物對酵母多糖引起的急性炎症反應也有一定影響,其用程度與給藥途徑密切相關。

蜂膠水提取物學能增加宿主對革蘭氏陰性病原菌(如致病大腸桿菌、肺炎克氏桿菌、普通變形桿菌、假單胞桿菌)的抵抗作用,儘管水提取物在體外對上這致病菌無抑制作用,但是它可以誘導宿主產生非特異性保護。體內試驗表明,蜂膠水提取物可以啟動巨噬細胞,以保護宿主免受病原微生物的入侵。

蜂膠還被用於製作家畜的免疫佐劑,用蜂膠做免疫佐劑比用皂素做佐劑的大白鼠的淋巴結漿細胞增生強 3.7 — 6 倍,其血清凝集素滴度高 3.7 — 4 倍。用相當於蜂膠於物質 2.4mg 對蜂膠乙醇提取液飼喂體重 1kg 的家免,丙種球蛋白增長迅速,從而對抵禦疾病產生直接作用。蜂膠還作為破傷風類毒素免疫過程中增長非特異性和特異性免疫因數的刺激劑。

研究證明,蜂膠通有效地增強人體的免疫能力,促進吞噬細胞的作用,剌激體內產生抗體,抵抗多種疾病。

3 . 5 、蜂膠的抗氧化作用研究

巴西蜂膠的水提取物、甲醇提取物和氯仿提取物均有清除 1.1-Ciphenyl-2-picryhydrazyl 自由基和 O 2 自由基的作用, Basnetp 等從巴西蜂膠的水提取物中分離出一種苯基丙烯酸衍生物的化合物,其抗氧化作用強於維生素 C 和維生素 E 。

德國學者 R.Volpert 在研製蜂膠消炎藥和燒傷藥時發現,蜂膠的水提取物對心肌黃嘌呤和黃嘌呤氧化酶催化的氧化反應均有抑制作用,對吲哚乙酸的過氧化反應也有抑制作用,其抗氧化作用可能與其所含的單酚和多酚化合物有關。

化學發光法研究表明,兩種古巴蜂膠醇提取物對黃嘌呤 - 黃嘌呤氧化酶產生的超氧陰離子均有捕獲能力。它們的濃度為 5 μ mol/ml 和 9.5 μ mol/ml 時對超氧陰離子自由基的抑制變幻無常為 50% ,與 72 μ g/mlSOD 或 0.15 μ /ml 兒茶素等效。對烷氧自同基的半數捕獲濃度為 0.6 μ g/ml ,與 0.11 μ g/ml 維生素 E 等效。蜂膠醇提取物對魯米咪諾 -H 2 O 2 產生的化學發光也有抑制作用,這可能與其所含有的黃酮類分合物有關。

蜂膠水提取物還可以保護纖維細胞免受高壓氧的脅迫,這可能是蜂膠水提取物具有抗炎症作用的機制。

蜂膠中的活性物質咖啡酸苯乙酯還是脂氧合酶的水競爭性抑制劑,當 CAPE 濃度為 10 μ mol/L 時,它可以完全阻斷人中性白細胞和黃嘌呤 - 黃嘌呤氧化酶體系產生的活性氧。

3 . 6 蜂膠對心血管系統的作用

蜂膠中含有大量的黃酮、黃酮醇等物質,對心血管系統有一定的改善作用。用蜂膠為主要原料開發的真理蜂膠營養液,通過飼喂高血脂大鼠的實驗,結果可顯著抑制和降低血液 TG 和 TC 含量,升高高密度蛋白的水準,且高、中、低劑量組與對照組相比均有顯著差異。 Chopra 等報導,實驗動物靜脈注射阿黴素 10mg/kg 造成非炎性心肌病模型後,在腹腔注射 50mg/kg 和 100mg/kg 蜂膠,能顯著降低血清肌磷酸醯酶、天冬氨轉氨酶的活性以及血液和肌肉組織中 GSH 的硫代巴比妥生成物的含量。與蘆丁進行了比較,表明蜂膠對要蜂膠對阿黴素誘導的心肌毒性有保護作用。

3 . 7 蜂膠的消炎和抗變態反應

動物試驗表明,蜂膠(產于巴西南部)對乙酸( 0.6% )、高嶺土( 50mg/kg )和酵母聚糖( 40mg/kg )誘導的腹腔收縮有不同程度的抑制作用,半抑制率分別為 2.7mg/kg , 10.8mg/kg 和 10.7mg/kg ,最大抑制率分別為 58% ± 5% 、 57% ± 10% 和 51% ± 5% 。當腹腔注射蜂膠後,可以減弱神經性的和炎症性疼痛反應,對腹腔注射甲醛( 2.5% )引起的足浮腫也有減緩作用。口服蜂膠 (20-200mg/kg, 1h ) 亦可以減弱神經性的和炎症性疼痛反應 , 和足浮腫的形成。蜂膠還能抑制辣椒堿誘導的疼痛,最大抑制率為 41% ± 8% 。以上結果表明,蜂膠醇提取物對化學物質引起的變態反應有顯著作用。

H.Miyataka 等建立了一種利用生物學的方法評價蜂膠的抗變態反應,用化合物 48/80 和伴刀豆球蛋白 A 誘導的組胺釋放,結果表明: ① 0.005%-0.1% 蜂膠醇提取物和 0.03%-0.1% 水提取物,均可抑制化合物 48/80 和伴馬豆球蛋白 A 誘導的組胺釋放,前者是後者的 10 倍,無論蜂膠的醇提取物還是水提取物都有抗變態反應; ② 蜂膠提取物和水提取物均可抑制組胺的釋放,並呈量效關係; ③ 采自中國河北、四川、浙江和安徽省的蜂膠,當蜂膠濃度為 0.003% 時,對伴刀豆球蛋白 A 誘導的組胺釋放的抑制製作用小於 0.01% ; ④ 中國蜂膠 0.03%-0.1% 的水提取物對 Con-A 誘導的組胺釋放有強烈的抑制作用,這可能在蜂膠水提取物中存在一些未知的非黃酮類化合物在發揮著抗變態作用。

3 . 8 蜂膠的抗輻射作用

蜂膠水提取物對 1Gy 和 6Gy 的 r - 射線照射小鼠面誘導的損傷有保護作用,研究者發現,當動物用離子射線照射後,血清酸性磷酸酶活性升高,血液中丙二醛濃度和 SOD 活性均顯著上升。當在輻照前給動物飼喂蜂膠水提取物後,血液中丙二醛濃度顯著下降,血清酸性磷酸活性也變正常,蜂膠水提取物還能刺激 SOD 的釋放,這些研究表明,蜂膠水提取物對 у 射線誘導的炎症反應有保護作用。

3 . 9 蜂膠的抗潰瘍作用

我國的科研工作者經過研究表明,蜂膠具有抗潰瘍作用,張震等進行蜂膠對大鼠實驗性胃潰瘍的療效觀察,用乙酸製成潰瘍模型,蜂膠組喂 2% 蜂膠乙醇液 6ml/d ,鹽水組喂等理鹽水, 14d 後將動物處死進行病理檢查,結果表明,蜂膠有促進組織修復的作用。蜂膠還能使胃潰瘍模型大鼠胃酸降低,對抗幽門結紮型潰瘍的形成,對抗應激型(ρ< 0.01 = 、酒精型(ρ< 0.01 ) 和 消炎藥 型(ρ< 0.001 ) 潰瘍的形成。金春玉等研究發現,蜂膠石油醚提取能明顯促進醋酸型潰瘍的癒合,對抗應激型潰瘍的形成,並降低胃液中游離酸度和增加胃壁粘性的含量。蜂膠石油醚萃取物抗潰瘍作用可能與改善局部血液迴圈,促進組織再生修復,增加胃粘液和 PEG 2 含量,抑制胃酸分泌,影響交感腎上腺髓質系統等。

4 [ 臨床應用 ]

4 . 1 蜂膠對口腔疾病的治療作用

蜂膠用於治療口腔疾病在西方國家有關悠久的歷史,近年來體內和體外的藥理研究表明,蜂膠對唾液細菌和鏈球菌齒斑均有不同程度的抑制作用,在治療口腔潰瘍方面取得了滿意的效果。王淑靜於 1986 年用蜂膠乙醇液治療口腔潰瘍,治療患者 70 例,其中復發性口瘡 60 例,粘膜壞列周圍炎 5 列,皰疹型口腔炎 2 例,外傷性潰瘍 3 例。治療結果:止痛效果 100% 。潰瘍而越小,癒合越快,最快 24h 上皮癒合。洪民等用 50% 蜂膠複合藥膜敷貼治癤周以上口腔粘膜白斑患者 45 例,獲痊癒及顯著療效者 42 例,達 93.9% ,對厚白斑也有較好的療效,痊癒病例最短的療程為 2 周,大多數患者敷貼後無任何不適。龐勁凡等將膠提取物製成 50% 複合藥抹在病變區粘膜,每日 1 — 3 次, 2 周為一個療程,結果痊癒 28 例,顯效 14 例,好轉 3 例,以平滑型療效最 佳,痊癒病倒用藥 1 — 4 個療程,無明顯副作用。沈勝利等用蜂膠膜劑每日 2 — 3 次貼在口腔潰瘍表面,治療了 32 例患者,結果 2 — 9d 癒合占 90.68% ,其中 2-6d 癒合占總數的 2/3 以上,能顯著地縮短潰瘍癒合時間。曾萬康等也用蜂膠治療復發性口瘡 125 例,結果治癒 113 例,占 90.4% ,好轉 8 例,占 6.4% ,無效者 3 例,總有效率達 96.8% 。 Ikenok 等研究發現,蜂膠不僅對幾種口腔鏈球菌的非水溶性葡聚糖的形成和葡基轉移酶活性有抑制作用,而且對幾種鏈球菌致鼠齲齒有治療作用。其機制是蜂膠可以抑制微生物活性,抑制非水溶性葡聚糖的合成和抑制葡基轉移酶活性。 O.Magro Filho 等將蜂膠應有於修補牙槽取得較好的療效。
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