病毒是一类细胞内病原体,具有传染性和亲器官性的特点。病毒感染的传染性疾病,如:病毒性肝炎,流感、脑炎、肺炎、疱疹、腮腺炎等一直困扰着人类。20世纪80年代以来,随着艾滋病的传播,病毒感染的疾病对人类键康和生命的威胁日益引起国际社会的重视。艾滋病已成为全球范围的严重问题,自1981年美国报告首例AIDS病例之后,大量的AIDS患者和引起AIDS的HIV感染者在全球骤然增加。2000年全世界HIV感染者达4000万,AIDS患者达1000万。我国自1985年发现首例艾滋病病人以来,HIV感染者上升速率达每年30%左右,至2000年底,我国HIV感染者已超过60万人,以15-49岁青壮年为主,男女比例为5:1。为了预防和治疗这种疾病,已开展了广泛的研究,但尚未发现确实有效的药物。
最近,由冠状病毒感染引起的非典型性肺炎(SARS),在不到半年的时间内肆虐全球,使我国患者达4900多例,全球患者达7000余例。全力以赴战胜瘟疫,已成为我国的头等大事,成为全球医药界协同攻克的主要目标。
病毒是最简单的细胞内寄生微生物,其基本结构仅是核酸和蛋白质的外壳,必须利用活细胞宿主的各种生物化学机制进行复制。病毒的结构、酶和复制机制是抗病毒药物的作用靶点。由于病毒生存在细胞内,复制周期与细胞的代谢密切相关,病毒利用细胞的酶系统进行代谢活动,本身很少有独立的酶系统。抗病毒药物在攻击病毒的同时,往往对宿主产生毒性反应。因此,抗病毒药物的研究与开发困难重重,抗病毒药物的发展与抗菌和抗肿瘤药物相比较要缓慢和落后得多。临床用的有效抗病毒药物不多,大多是盲目普筛或偶然发现的,且均有较大的毒性,有的毒性作用甚至接近宿主可承受的极限。目前,对病毒感染的治疗仍然在很大的程度上依赖免疫学方法和干扰素等。
迄今,美国FDA批准生产上市的抗病毒药物有:amantadine, 阿昔洛韦(acyclovir,对HSV,VZV),利巴韦林(ribavirin,
呼吸道合胞病毒),更昔洛韦(ganciclovir,CMV)、法昔洛韦(famiciclovir,VZV)、索利洛韦(sorivudine,HSV),idoxuridine,
trifluridine, vidarabine和zidovudine。常用的还有病毒痤,以及抗艾滋病的AZT等。除amantadine
为金刚烷类化合物外,其余均为寡核苷酸衍生物。
抗病毒药物体外筛选主要以病毒整合过程前和转录后的各阶段作为靶点。对逆转录酶 (reverse
transcriptase)、整合酶(integrase)、蛋白酶(protease)、糖甙酶、病毒蛋白酶、RNA酶H(Rnase
H)、对病毒核酸、以及对病毒装配的抑制活性均是抗病毒药物研究的重要领域。其中,逆转录酶抑制剂在抗逆转录病毒的新药研究中非常活跃。
抑制病毒增殖也是常用的抗病毒活性成分体外筛选的手段。选择合适的培养基,建立病毒-细胞培养系,采用噬斑法(空斑减少法),以细胞病变(CPE)为指标,用荧光抗体法、酶联免疫吸附测定法、多聚酶联反应法等测定病毒增殖的抑制活性、病毒抗原和核酸量,探讨抑制病毒增殖的效果。根据病毒在宿主细胞内的阶段性增殖过程,还可检测对病毒吸附、逆转录酶活性、蛋白合成与修饰、出芽等过程的阻断作用。
体内抗病毒活性筛选与评价,关键是要建立规范的病毒感染动物模型。
目前,国际上抗病毒药物的研究的主要策略包括:阻断病毒与靶细胞的结合、抑制逆转录酶、抑制病毒蛋白翻译、抑制蛋白质修饰或病毒颗粒的出芽释出、以及切断病毒基因组等。通过对已知疗效化合物进行结构改造、计算机设计先导分子、反义寡核苷酸结构改造和组合化学合成、免疫功能调节剂的研制、以及从植物和微生物中筛选天然抗病毒先导化合物等,研究开发新的抗病毒药物。从天然产物中开发高效低毒的抗病毒药物已成为人们注视的焦点。
从植物发现天然抗病毒活性的化学物质,是开发抗病毒的天然药物的重要途径。特别是我国的传统中医药和民族民间医药经验中,蕴藏着极为丰富的宝藏,在发掘新的抗病毒有效物质和天然药物方面有着十分广阔的前景。本文简要介绍的中药复方可能对病毒有作用。本文亦介绍近年从植物药中发现的一些抗病毒活性成分。
A,抗病毒的中药复方:
1,扶正固本方剂
一贯煎 | 沙参、麦冬、当归、生地、枸杞子、川楝子 |
大补元煎 | 人参、炒山药、熟地、杜仲、枸杞子、当归、山茱萸、炙甘草 |
天王补心丸 | 人参、玄参、丹参、茯苓、五味子、远志、桔梗、当归、天冬、麦冬、柏子仁、酸枣仁、辰砂 |
加减葳蕤汤 | 玉竹、葱白、桔梗、白薇、豆豉、薄荷、炙甘草、大枣 |
当归六黄丸 | 当归、生地黄、熟地黄、黄连、黄芩、黄柏 |
虎潜丸 | 龟板、黄柏、知母、熟地黄、白芍药、锁阳、陈皮、虎骨、干姜 |
知柏地黄丸 | 知母、黄柏、熟地黄、山茱萸、山药、茯苓、泽泻 |
黄连阿胶丸 | 黄连、阿胶、黄芩、鸡子黄、芍药 |
沙参麦冬汤 | 沙参、麦冬、玉竹、桑叶、甘草、天花粉、生扁豆 |
生脉散 | 人参、麦冬、五味子 |
六君子汤 | 人参、炙甘草、茯苓、白术、陈皮、制半夏 |
四君子汤 | 丹参、白术、茯苓、甘草 |
安神定志丸 | 茯苓、茯神、远志、人参、石菖蒲、龙齿 |
补肺汤 | 人参、黄芪、熟地、五味子、紫菀、生白皮 |
参苏饮 | 人参、苏叶、葛根、前胡、法半夏、茯苓、橘红、甘草、桔梗、枳壳、木香、陈皮、姜枣 |
香砂六君子汤 | 木香、砂仁、党参、陈皮、半夏、甘草、茯苓、白术 |
人参养营汤 | 人参、甘草、当归、白芍、黄芪、肉桂、大枣、白术、茯苓、熟地、五味子、远志、枳皮、生姜 |
七味都气丸 | 地黄、山茱萸、山药、茯苓、丹皮、泽泻、五味子 |
大补阴丸 | 知母、黄柏、熟地、龟板、狗脊髓 |
六味地黄丸 | 熟地、山药、茯苓、丹皮、泽泻、山茱萸 |
左归丸 | 熟地、山药、杞子、山茱萸、杜仲、甘草、附子、肉桂 |
百合固金丸 | 生地、熟地、麦冬、贝母、百合、当归、炒芍药、甘草、玄参、桔梗 |
杞菊地黄丸 | 枸杞子、菊花、熟地、山茱萸、山药、泽泻、丹片、茯苓 |
河车大造丸 | 紫河车、熟地、杜仲、天冬、麦冬、龟板、黄柏、牛膝 |
秦艽鳖甲丸 | 地骨皮、秦艽、柴胡、知母、鳖甲、青蒿、乌梅、当归 |
清燥救肺汤 | 桑叶、石膏、杏仁、甘草、麦冬、人参、阿胶、炒胡麻子、炙枇杷叶 |
六君子汤 | 人参、白术、茯苓、甘草、大枣、粳米 |
十全大补汤 | 熟地、白芍、当归、人参、白术、茯苓、炙甘草 |
玉屏风散 | 黄芪、白术、防风 |
加味四君子汤 | 人参、白术、茯苓、炙甘草、黄芪、白扁豆 |
补中益气汤 | 人参、黄芪、白术、甘草、当归、陈皮、升麻、柴胡 |
参附汤 | 人参、熟附子、姜枣 |
参苓白术散 | 人参、茯苓、白术、桔梗、山药、甘草、白扁豆、莲子肉、砂仁、薏苡 |
乌鸡白凤丸 | 乌鸡、人参、鹿角胶、牡蛎、白芍、当归、黄芪、鳖甲、桑螵蛸、生地、熟地、川芎、甘草、丹参、芡实、山药、银柴胡、鹿角霜、天冬、制香附 |
八珍汤 | 人参、白术、茯苓、甘草、当归、白芍、熟地、熟地、生姜、大枣 |
四物汤 | 当归、白芍药、川芎、熟地 |
归脾汤 | 党参、黄芪、白术、茯神、酸枣仁、龙眼、木香、炙甘草、当归、远志、生姜、大枣 |
炙甘草汤 | 炙甘草、人参、桂枝、生姜、阿胶、生地、麦冬、火麻仁、大枣 |
黄芪建中汤 | 黄芪、芍药、桂枝、炙甘草、大枣、饴糖 |
右归饮 | 熟地、山茱萸、杞子、山药、茯苓、甘草 |
实脾汤 | 附子、干姜、白术、甘草、厚朴、木香、草果、槟榔、木瓜、生姜、大枣、茯苓 |
理中汤 | 人参、白术、干姜、炙甘草 |
真武汤 | 炮附子、白术、茯苓、芍药、生姜 |
当归补血汤 | 黄芪、当归 |
养心汤 | 黄芪、茯苓、茯神、当归、五味子、人参、肉桂、川芎、炙甘草、半夏曲、柏子仁、酸枣仁、远志 |
右归丸 | 熟地、山茱萸、杞子、山药、杜仲、菟丝子、附子、肉桂、当归、鹿角胶 |
附子理中汤 | 熟地、山茱萸、杞子、山药、茯苓、甘草甘草 |
《金匮》肾气丸 | 桂枝、附子、熟地、山茱萸、山药、茯苓、丹皮、泽泻 |
2,清热解毒类方剂
八正散 | 木通、车前子、瞿麦、滑石、甘草梢、大黄、山栀、灯芯 |
《千金》苇茎汤 | 鲜芦根、薏苡仁、冬瓜仁、桃仁 |
牛黄解毒汤 | 牛黄、冰片、雄黄、桔梗、黄芩、甘草、大黄、生石膏 |
紫血丹 | 石膏、寒冰石、滑石、磁石、犀角屑、羚羊角屑、青木香、沉香、玄参、升麻、甘草、丁香、朴硝、硝石、麝香、朱砂、黄金 |
白头翁汤 | 白头翁、黄柏、黄连、秦皮 |
冰硼散 | 冰片、硼砂、元明粉、朱砂 |
五味消毒饮 | 金银花、野菊花、蒲公英、紫花地丁、紫背天葵 |
龙胆泻肝汤 | 龙胆草、泽泻、木通、车前子、当归、柴胡、生地 |
至宝丹 | 朱砂、麝香、安息香、金银箔、犀角、牛黄、琥珀、雄黄、玳瑁、龙脑 |
竹叶石膏汤 | 竹叶、石膏、麦冬、人参、半夏、粳米、甘草 |
异赤散 | 生地、木通、竹叶、甘草 |
茵陈五芩散 | 茵陈、桂枝、茯苓、泽泻、白术、猪苓 |
清骨散 | 胡黄连、银柴胡、秦艽、鳖甲、地骨皮、青蒿、知母、甘草 |
普济消毒饮 | 黄芩、黄连、连翘、玄参、板蓝根、马勃、牛蒡子、僵蚕、升麻、柴胡、陈皮、桔梗、甘草、薄荷 |
葛根芩连汤 | 葛根、黄芩、黄连、炙甘草 |
犀黄丸 | 犀角、没药、麝香、乳香 |
三仁汤 | 杏仁、白蔻仁、厚朴、半夏、通草、滑石、竹叶 |
黄连解毒汤 | 黄连、黄芩、黄柏、栀子 |
当归龙荟汤 | 当归、龙胆草、栀子、黄连、黄柏、黄芩、芦荟、大黄、麝香 |
清瘟散毒饮 | 石膏、知母、甘草、竹叶、犀角、地黄、丹皮、赤芍、玄参、黄连、黄芩、栀子、连翘 |
锡类散 | 珍珠、牛黄、冰片、青黛、象牙屑、人指甲、壁钱炭 |
小柴胡汤 | 柴胡、黄芩、半夏、人参、甘草、生姜、大枣 |
甘露消毒丹 | 滑石、茵陈、射干、连翘、薄荷、白蔻仁、知母、石膏、甘草、粳米、人参 |
白虎加参汤 | 知母、石膏、甘草、人参、粳米 |
安宫牛黄丸 | 牛黄、郁金、犀角、黄连、朱砂、冰片、珍珠、山栀、雄黄、黄芩、麝香、金箔衣 |
清金化痰汤 | 黄芪、山栀、桔梗、麦冬、桑白皮、知母、贝母、瓜蒌仁、橘红、茯苓、甘草 |
增液汤 | 玄参、麦冬、生地 |
清肺饮 | 茯苓、黄芪、桑白皮、麦冬、车前子、山栀、木通 |
银翘散 | 金银花、连翘、豆豉、牛蒡子、薄荷、荆芥穗、桔梗、竹叶、鲜芦 |
犀地地黄汤 | 犀角、生地、丹皮、芍药 |
清营汤 | 犀角、生地、丹参、玄参、竹叶心、麦冬、黄连、银花、连翘 |
B,抗病毒的植物化学成分
1,酚类化合物
(1)黄酮类:
从中药霍香(Agastache
rugosa Kuntze)中分离到的3,7,3’-trimethyl-quercetin(Ro09-0179),体外0.1-0.5ug/ml低浓度对HRV、脊髓灰质炎病毒(poliovirus)等戈病毒(mengovirus)以外的所有小核糖核酸病毒(picornavirus)有显著抑制作用,对RNA和DNA病毒则无活性,显示很强的特异性,该化合物细胞毒活性不高(对HeLa细胞50%抑制率为15ug/ml),小鼠腹腔给药300mg/kg无毒性反应。合成的数百个衍生物中,Ro04-4498有显著的活性,而2’-hydroxy-4’-ethoxy-4,6’-dimethoxychalchone(Ro09-0410)对多种人鼻病毒(rhinovirus)的抑制作用达0.001-3ug/ml,对HRV显示极高的选择性抑制作用,85%抑制率为MIC
0.03ug/ml),在30ug/ml浓度对 HeLa细胞显细胞毒作用。此外,二氢衍生物(Ro09-0478)和氨基衍生物(Ro09-0535,Ro09-0696)对HRV的抑制活性较Ro09-0410强数倍至数十倍(Ishitsuka
et al., Antimicrobial Agents and Chemotherapy, 22, 611-616, 1982)。这类化合物的作用机理是通过稳定病毒壳蛋白,防止病毒RNA释放所必须的构型转化来影响病毒在宿主细胞中的脱壳过程(Ninomiya
et al., Virology, 134,269-276, 1984)。
以体外的鼻病毒抑制活性为指标,对一系列黄酮和黄烷类化合物进行构效关系研究,发现4,6’-dichloroflavon 活性最强(Bauer
et al., Nature, 292,369-370,1981)。在3-methoxyflavones衍生物中,则以A环取代的jaranol
(5,4’-dihydroxy-3,7-dimethoxyflavone)和penduletin
(5,4’-dihydroxy-3,6,7-trimethoxyflavone)的活性最强。用EPTT法筛选,其同系物4’,7-dihydroxy-3-methoxy-5,6-dimethylflavone体外抗1型脊髓灰质炎病毒(poliovirus)和15型鼻病毒的活性分别为TI99
>1000和200;对各种鼻病毒的抑制作用MIC50为
0.016-0.5ug/ml,建议进入临床评价。4’-hydroxy-3,7-dimethoxy-5-methylflavone等同系物亦有类似的活性。
非洲产大戟属(Euphorbia)植物中分离到一系列3-methoxyflavones如3-methyl-quercetin,
3-methyl-kampferol 等有显著的抗病毒活性(Van Hoof et al., Plant Med.,
50,513-517,1984)。
此外quercetin,fisetin,橙皮甙等均有抗病毒活性。
(2)
(2)
香豆素类:
从热带植物毛胡桐(Calophyllum
lanigerum)的果实和幼枝中分离到的calanolide A对HIV-1有高度特异性,对齐多夫定和pyridinone的耐药株有效,被称为第二代非核苷类逆转录酶抑制剂。II期临床试验正在进行中。(国外医学植物药分册,15(6):244,2000)
(3)
(3)
木质素:
四川产灰木科植物Symplocos setchuansis茎的乙醇提取物抑制HIV活性为EC50
<20ug/ml,TI>5, 从中分离到matairesinol,该化合物及其二乙酰化物对H9 淋巴细胞(lymphocytic
cells)中HIV-1复制的抑制作用为 IC50 21.9 uM, EC50 2.0 uM, TI 11.0。同类化合物(-)arctigenin
和(-)trachelogenin 曾报道具有抑制HIV-1复制作用,matairesinol对HIV-1
整合酶(integrase)无活性,其可能作用于HIV复制的其他步骤(
J.Ishida, K.H.Lee, et al,. J.Nat. Prod. 64,958-960, 2001)。
(4)原花色素类:
西非产茜草科植物Pavetta
owariensis P.Beauv. 树皮经活性追踪,分离到proanthocyanidin
dimer和trimer分别在250ug/ml 和 62.5ug/ml
http://www.kib.ac.cn/ChineseMedicine/Virus-1.htm
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